此篇文章于发表在Plant Biotechnol J上,通过对有腺植物和无腺植物胚胎的RNA序列分析,鉴定出33个基因在有腺植物的腺体形成之前就在胚胎中高水平表达。GoPGF(CGF3)的过表达导致棉酚和相关萜类化合物的显着增加,而Cas9敲除GoPGF(CGF3)基因导致无腺体表型。
转录组分析了有腺体和无腺体棉花发育的胚胎,对两种不同腺体类型的三个不同发育阶段进行RNA-seq。在有腺的棉种的14dpa的胚中,即腺体形成前的1-2天,有33个基因表达显着高于对照。
然后通过VIGS筛选出了CGF1和GoPGF(CGF3)基因的腺体数量出现显着的减少。CGF2叶片中腺体的在颜色和结构方面与棉花腺体有很大的不同。并且萜类化合物含量降低,可能是由于腺体较少较少所致。
qRT-PCR分析了有腺和无腺体胚胎中CGF基因,这些CGF基因在14-16dpa的发育阶段的胚胎中,在无腺体中的表达明显低于有腺胚胎。
CGF在无腺体胚胎中几乎没有活性。对有腺体和无腺体的棉花植株中的基因及其同源序列进行了测序。发现有腺体和无腺体两个GoPGF基因观察到序列有SNP,插入位点和缺失位点的差异。
利用Cas9敲除CGF2基因降低了叶片的腺体密度和萜类物质,而GoPGF基因敲除导致无腺体表型。证实了GoPGF是腺体发育的关键调控因子。
在棉花愈伤组织中过表达GoPGF可以显着提高萜类化合物的含量。