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16S测序结果详细分析过程

时间:2021-12-02 11:45:37

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16S测序结果详细分析过程

原创: 生信菜鸟驿站 -06-21

1.公司返回的测序文件

16s测序数据公司反馈的文件包括几种,比如:

一般Excel表格里面呈现的是测序进度、有无条带和测序成功与否的结果。

另一个文件则是对应样本的峰图和碱基序列(公司一直强调:最好以峰图导出的序列为准)。

峰图用什么软件打开,我上篇文章已经提到了,大家可以翻上去看看。

文件类型其实主要还涉及:

前期给出的是两个引物各自分开的序列/峰图;

最后会给出拼接之后的文件。

如果需要自己拼接,请点击阅读原文中的文章。

PS:由于测序技术还有不足,每个测序反应一般仅有800bp左右比较准确。

一般测序结果的前端大约50个碱基的质量会不好(测序引物的原因),此部分测序峰图通常无法判读。这是正常现象,需要把此部分碱基切除。同理,测序后期的碱基质量也比较差(酶活降低与杂质干扰较大等原因),也需要把尾部测序峰图不规则的碱基切除。因此留下中间碱基质量相对较好(峰图规则)的序列用于后续分析。

(来自阅读原文)

2.得到拼接序列之后怎么办?

得到拼接序列之后,只需要点击参考文摘3的网址进入即可:

3.直接输入上面的拼接序列即可:

点击submit即可。

4.搜索结果如下:

5.依据域界门纲目科属种选择之后下载序列:

参考文摘:

1.力基因学堂

2.https://mp./s?__biz=MzUzMjEyMDE1NA%3D%3D&mid=2247483879&idx=1&sn=14e457cca3670af3eca4eec2bb050be1&scene=45#wechat_redirect

3.http://rdp.cme.msu.edu/classifier/classifier.jsp

阅读原文

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