导读
近日，中华医学会儿科学分会临床检验学组组织编写的《儿童肺炎支原体呼吸道感染实验室诊断中国专家共识》（下称“共识”）已经见刊，其中详尽阐述了各种用于检测肺炎支原体（MP）感染的实验室方法相关内容。
共识意义在于规范了儿童呼吸道Mp感染的实验室诊断方法的类型、概念和价值，旨在根据患者现症和既往、门诊和住院、筛查和确诊等不同的感染情况选择不同的检测方法，结合患者临床症状、体征以及胸片等其他辅助检查，同时对患者年龄、全身状况、用药、病程等综合判断，为临床Mp感染的诊断提供合理、经济、高效的参考建议。
共识再次提出Mp是儿童社区获得性肺炎（community-acquired pneumonia，CAP）的重要病原体，可占CAP的10%~30%，Mp流行时可增加3~5倍。
同时共识指出，治疗Mp感染的首选药物大环内酯类抗菌药物耐药性已经接近100%，重症Mp肺炎治疗挑战性大，需要早诊断、早治疗，实验室病原学诊断是Mp感染诊断的关键。
共识对于不同检测方法应用的注意事项进行了如下阐述：
方法学
检测方法注意事项
病原学检测
1培养法
灵敏度差，特异性好，3~7 d培养，时间长，快速培养不符合MP生长时间建议确诊方法复测。
2肺炎支原体的直接检测
此类方法方便快捷，但易受人为因素干扰，如未取到感染细胞、没有选中合适的视野或其他病原及自身的交叉抗体干扰等，均会影响结果。
3分子生物学
3.1DNA检测技术
灵敏度和特异性都能满足临床需求。但是Mp死亡后其DNA仍可存在于部分患者体内，时间达7周~7个月，且不易降解，导致DNA检验结果不能很好地用于治疗效果的评估。
3.2RNA检测技术
由于RNA随病原体死亡而降解，可作为评价Mp感染转归、药物疗效的指标，其检测结果与Mp的感染严重程度相关性较好，因此Mp的RNA检测是目前早期快速诊断、判断疗效的最好方法之一。
血清学检测
ELISA
可以分型检测IgM、IgG等抗体亚型。但包被的Mp抗原来源多样，建议选择敏感度和特异度均较高的抗原包被试剂盒检测。
PA
患者血清Mp抗体滴度≥1：160作为Mp近期或急性感染的诊断标准；恢复期和急性期Mp抗体滴度呈4倍及以上增高或减低时，可确诊Mp感染。
GICT
定性试验，患者抗体含量较低时可能造成漏检，且抗体在部分治愈患者体内持续存在，使得对短期内再次感染的阳性判断造成困扰。
CLIA（化学发光法）
CLIA的原理是将发光物质直接标记在Mp抗原上（指直接化学发光原理试剂），或免疫复合物上的酶作用于发光底物（指酶促化学发光方法），通过大型发光仪测量光量子产额，定量、成批地检测Mp的IgM、IgG。
IFA
实验易受人为判断荧光结果影响，包被抗原含量不足可能会产生假阴性，体内含有类风湿因子、多种自身免疫性抗体等与包被抗原有交叉反应可能出现假阳性。
CFA
与其他检测方法相比，CFA采用糖脂抗原，特异性较差，操作过程中存在较多干扰，目前已经很少用于Mp临床诊断。
CAT
冷凝集素增高也可见于其他疾病，如流行性感冒、传染性单核细胞增多症、风疹等，故CAT的特异性差，现已逐渐被其他Mp的检测方法取代。
共识文件对实验室Mp血清学检测结果的判读进行了说明
方法
结果
判读指导
PA法
PA法滴度≥1∶160
提示近期或现症感染。
分型检测方法
IgM
IgA
IgG
+
-
-
近期感染
+
+
-
现症感染
-
-
+
既往感染
+
+
+
现症感染或近期感染
+
-
+
-
+
+
所有方法
间隔2~4周双份血清抗体亚型转化/血清抗体水平4倍及以上增加或降低确诊Mp感染
共识对MP检测的质量控制提出全面具体的要求
共识提出Mp检测的质量控制是获得准确可靠结果的前提，并对检验的质量控制从检验前、中、后质量控制三部分进行了阐述。在检验方法选择的建议上提出：病原学与血清学联合诊断仍然是目前提倡的Mp感染诊断策略
对病原学与血清学联合开展的结果分析建议
病原学检测结果
血清学检测结果
解释
+
+
基本可确诊为Mp感染。此类患者，发病时间多超过一周，抗体已经产生，后期进行疗效观察时可采用RNA检测。
+
-
基本可确诊为Mp早期感染。
其一，发病时间较短，抗体尚未产生；
其二，免疫系统发育不完善、免疫功能低下，未产生抗体或抗体滴度较低。抗体效价4倍变化可进一步确证Mp感染。
-
+
需依据抗体阳性类型和滴度来判断Mp的现症或既往感染，多为治疗后的既往感染。
-
-
Mp感染的可能性很小，需要进一步鉴别诊断时可监测抗体滴度或重新采样。
本次共识文件首次提出了清晰明确的Mp实验室诊断流程图，是本次共识的一项全新突破。
参考文献：中华医学会儿科学分会临床检验学组，中华检验医学杂志,,42(7):507-513
专家组成员：
（马丽娟、张泓、孙红妹执笔）
参与编写的专家（按姓氏汉语拼音排序）：葛梦蕾（首都儿科研究所附属儿童医院检验中心）；贾伟（宁夏医科大学总医院医学实验中心）；江咏梅（四川大学华西第二医院检验科）；蒋玉红（青岛市妇女儿童医院检验科）；李贵霞（河北省儿童医院检验科）；林书祥（天津市儿童医院儿科研究所）；马丽娟（首都儿科研究所附属儿童医院检验中心）；莫丽亚（湖南省儿童医院检验中心）；渠巍（贵阳市妇幼保健院/贵阳市儿童医院检验科）；尚世强（浙江大学医学院附属儿童医院实验检验中心）；孙红妹（首都儿科研究所细菌研究室）；杨铭华（哈尔滨市儿童医院检验科）；张泓（上海交通大学附属儿童医院检验科）；张乐海（山东大学齐鲁儿童医院科教外事科）。
参与征求意见的专家（按姓氏汉语拼音排列）：陈红兵（南京医科大学附属儿童医院检验科）；成玲（福建省妇幼保健院医院感染管理科）；段荣（江西省儿童医院检验科）；樊茂（昆明医科大学附属儿童医院检验科）；傅启华（上海儿童医学中心检验科）；黄晶（吉林大学第一医院检验科）；马东礼（深圳市儿童医院检验科）；马慧英（青海红十字医院检验科）；强荣（西北妇女儿童医院医学遗传中心）；阮强（中国医科大学附属盛京医院检验科）；佘尚扬（广西壮族自治区妇幼保健院/儿童医院检验科）；石磊（兰州大学第二医院/甘肃省儿童医院检验医学中心）；宋文琪（国家儿童医学中心首都医科大学附属北京儿童医院检验中心）；孙立颖（北京大学第一医院检验科）；田礼军（徐州市儿童医院检验科）；王洁（海南省妇幼保健院/儿童医院检验科）；翁莹（华中科技大学同济医学院附属同济医院检验科）；吴亦栋（杭州市儿童医院检验科）；徐锦（复旦大学附属儿科医院临床检验中心）；向赟（华中科技大学同济医学院附属武汉儿童医院检验科）；杨治理（内蒙古自治区妇幼保健院/儿童医院/妇产医院检验科）；张文利（乌鲁木齐儿童医院检验科）；赵锐（山西省儿童医院检验科）；赵晓明（郑州大学第一附属医院儿科实验室）；张鹏辉（重庆医科大学附属儿童医院检验科）；郑晓群（温州医科大学附属第二医院育英儿童医院检验科）；周珍文（广州市妇女儿童医疗中心检验科）；朱宏（苏州大学附属儿童医院检验科）。
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